动物基础试验技术包5级(0500000)。
颜色与之前的荧光绿色,略有不同,它成了淡金色。
虽然没有太刺目和耀眼的变化,不过方子业作为技能拥有者,知道自己如今已经掌握了许多与动物基础试验的内容。
动物基础实验技术,并非一定就是基础,而是基础的方法学,是操作对象的基础,而不是操作技术非常基础,是个人都会。
技能是方法学的掌握,但掌握了方法学,并不代表,就完全彻底精通了所有的动物试验,还是要靠最基本的原理和思路,去完成动物实验的设计。
动物模型建立,只是很多动物实验中的一种。
在很早之前,方子业就知道,动物模型要建立,其实要用到的方法学叫基因编辑。
基因编辑技术在名词解释时,非常简单!
即对生物体基因组特定目标进行修饰的过程。高效而精准的实现基因插入、缺失或替换,从而改变其遗传信息和表现型特征。
可要真正的操作起来,难度不小。
毕竟基因编辑技术,首先在大方向上,就可以分成基因敲除和基因敲入,这其实与细胞实验中的沉默和过表达某种基因是类似的道理。
其基本原理非常简单……
方子业并未多想,而是在想,如何要通过这个操作技术,对当前的自己,对自己实验方向的操作完成,是否会带来比较大的收益。
答案是显而易见的!
实验方向的设计,是要先于实验方向操作完成之前的。
一个是理论认知,一个是操作到达。
相当于预先的设计是你知道一个地方存在,实验的完成,则是你亲自去到了,你想要去到的地方,这是两种不同概念。
而实验方向的设计,其实并不需要伱拥有超级高的操作能力,而是在于你对资料的搜集和总结能力,然后把大概的流程做出来。
至于是否能够完成,则是与个人能力有关。
稍微接触过科研的人都知道,每个人都可以想象出来一种,世界都感觉到震撼的技术方向,但这个想象是否可以完成,那就另说了。
比如说搭梯子到月球,长城贴瓷砖、太平洋游泳池的建立等等。
方子业很早之前,就做过了实验方向的设计,其中一个方向,就是HK2动物基因敲除模型的建立。
再次翻阅笔记本,慢慢阅读当时的实验设计,就显得泰然了许多。
现在的方子业,已经没有特别激动和兴奋的想法,反而,这个技术技能提升后啊,让方子业的心情和思维,变得稍微平静了很多。
方子业也不知道为什么!
明明啊,几分钟之前,自己都很想把这个课题完成,然后看看那位师伯的嘴脸的,结果实验技术加点上来后,这种心情反而是没有那么足了。
方子业猜测啊,可能,比起让那位师伯在师父面前无能为力,自己的能力提升,实力的差异化,使得方子业,更有一种成就感。
比起看某些人的嘴脸,方子业更希望做的事情是,真正地体会实验成果的快乐。
签字笔写过的笔记,墨迹已干——
实验设计和计划:
确定研究的科学目标和问题。制定实验计划,包括动物模型的选择、基因敲除的方法等。
动物模型的选择:
选择适当的实验动物,一般是小鼠或大鼠,取决于研究问题和模型的可行性。
这两点是完全摘抄了基础理论部分,属于是课题实验的总纲,没什么特别的意义。
更重要的是
确定HK2基因敲除的具体方法!
常见的包括CRISPRCas9技术、基因敲除小鼠的胚胎干细胞等。
只一句话,难度一下子就上来了。
CRISPRCas9技术,是一种基因编辑技术,编辑基因,就需要依靠这种技术,但是如何敲除,而且要在敲除后,得到基因小鼠的胚胎干细胞,一下子就变得迷离起来。
试验动物在进行了动物试验后,无法再繁殖,但不代表,实验动物模型从一开始,就是完成体。
这需要在小鼠受精后的胚胎干细胞阶段,就得将它们取出,进行基因编辑。
然后的操作步骤是:
设计基因编辑工具、基因编辑体外实验:
在体外对胚胎干细胞或其他适当的细胞进行基因编辑,验证编辑工具的有效性。
基因编辑体内实验:
将编辑过的胚胎干细胞或基因编辑工具引导到动物体内,通常是小鼠或大鼠的胚胎。
筛选正常的基因编辑体:
通过分子生物学技术,如PCR、Southernblottg等,筛选出成功敲除HK2基因的动物。
动物繁殖:
利用成功编辑的胚胎培育出整个基因敲除的动物,通常是通过繁殖和筛选产生基因敲除体的后代。
验证基因敲除效果:
对产生的基因敲除体进行详细的分子生物学和生化学分析,确认HK2基因是否被成功敲除。
这些看起来不可能,难度特别高的实验操作,方